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酶標(biāo)儀的原理是什么?

更新時間:2020-03-25點擊次數(shù):4089
 酶標(biāo)儀即酶聯(lián)免疫檢測儀。是酶聯(lián)免疫吸附試驗的儀器又稱微孔板檢測器。可簡單地分為半自動和全自動兩大類,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一個比色計,即用比色法來進(jìn)行分析。 測定一般要求測試液的終體積在250μL以下,用一般光電比色計無法完成測試,因此對酶標(biāo)儀中的光電比色計有特殊要求。
 
原理
酶標(biāo)儀實際上就是一臺變相光電比色計或分光光度計,其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計基本相同。光源燈發(fā)出的光波經(jīng)過濾光片或單色器變成一束單色光,進(jìn)入塑料微孔極中的待測標(biāo)本。該單色光一部分被標(biāo)本吸收,另一部分則透過標(biāo)本照射到光電檢測器上,光電檢測器將這一待測標(biāo)本不同而強弱不同的光信號轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的電信號,電信號經(jīng)前置放大,對數(shù)放大,模數(shù)轉(zhuǎn)換等信號處理后送入微處理器進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和計算,后由顯示器和打印機顯示結(jié)果。微處理機還通過控制電路控制機械驅(qū)動機構(gòu)X方向和Y方向的運動來移動微孔板,從而實現(xiàn)自動進(jìn)樣檢測過程。而另一些酶標(biāo)儀則是采用手工移動微孔板進(jìn)行檢測,因此省去了X,Y方向的機械驅(qū)動機構(gòu)和控制電路,從而使儀器更小巧,結(jié)構(gòu)也更簡單。
微孔板是一種經(jīng)事先包埋于放置待測樣本的透明塑料板,板上有多排大小均勻一致的小孔,孔內(nèi)都包埋著相應(yīng)的抗原或抗體,微孔板上每個小孔可盛放零點幾毫升的溶液。
光是電磁波,波長100nm~400nm稱為紫外光,400nm~780nm之間的光可被人眼觀察到,大于780nm稱為紅外光。人們之所以能夠看到色彩,是因為光照射到物體上被物體反射回來。綠色植物之所以是綠色,是因為植物吸收的大部分為紅橙光和藍(lán)紫光,但對綠色不吸收,反射出來,所以植物呈現(xiàn)為綠色。酶標(biāo)儀測定的原理是在特定波長下,檢測被測物的吸光值。
隨著檢測方式的發(fā)展,擁有多種檢測模式的單體臺式酶標(biāo)儀叫做多功能酶標(biāo)儀,可檢測吸光度(Abs)、熒光強度(FI)、時間分辨熒光(TRF)、熒光偏振(FP)、和化學(xué)發(fā)光(Lum)。
酶標(biāo)儀從原理上可以分為光柵型酶標(biāo)儀和濾光片型酶標(biāo)儀。光柵型酶標(biāo)儀可以截取光源波長范圍內(nèi)的任意波長,而濾光片型酶標(biāo)儀則根據(jù)選配的濾光片,只能截取特定波長進(jìn)行檢測。
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